Zeta Life转染试剂解决RAW264.7转染效率低的问题 时间:2020-03-26阅读:233 RAW264.7细胞转染效率低怎样提高转染效率一直是困扰实验者的一道难题,特别对于比较大的质粒DNA的转染更是困难;我们实验室用美国Zeta Life公司Advanced DNA RNA转染试剂货号AD600150转染raw 264.7细胞整理了一套优化方案希望对大家转染raw 264.7细胞提高转染效率有一定的帮助。下图是用美国Zeta Life公司Advanced DNA RNA转染试剂货号AD600150在6孔板转染8000bp左右的pEGFP-C1r到RAW264.7细胞的荧光和细胞明场图片。提高转染raw 264.7细胞条件如下一、质粒DNA准备1、质粒DNA浓度700ng/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素),我用QIAGEN试剂盒除去的内毒素二、操作流程1、先将细胞接种到细胞培养板,细胞汇合度在70%左右,再进行转染。2、复合物制备:将质粒DNA与Zeta Life公司Advanced DNA RNA货号AD600150转染试剂按照1:1(12ug:12ul)关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟。3、将复合物加入完全培养基的细胞培养板,并轻轻混匀,放入培养箱中继续培养(不建议把复合物加入到无血清的培养基里面,我后期会进一步摸索此条件)。4、转染24小时后对细胞进行正常换液。5、质粒DNA转染48小时后荧光检测转染效率三、注意事项:1本转染方法不适用在下面转染试剂的转染如:lipo3000、,FuGENE 6、FuGENE HD、Effectene等;2细胞培养Zeta Life z7181-500胎牛血清,Gibco的DMEM;四、美国Zeta Life公司Advanced DNA RNA转染试剂信息:产品名称货号规格数量报价Advanced DNA RNA 转染试剂AD6000250.25ML11590Advanced DNA RNA 转染试剂AD6000500.512390Advanced DNA RNA 转染试剂AD6000750.7512890Advanced DNA RNA 转染试剂AD6001501.5ML14490Advanced DNA RNA 转染试剂AD6005005ML1电询Advanced DNA RNA 转染试剂AD60100010ML1电询 上一篇: Zeta Life转染试剂高效率转染RAW 264.7方法总结 下一篇: Biocidal ZF消毒液喷壶使用说明